practica 9

Prueba de aglutinación de sangre

Tipo de prueba: tipo sanguíneo

El alumno de laboratorio de análisis clínicos debe realizar una prueba en Tejido sanguíneo (HB) para poder conocer, observar identificar y finalmente aplicar la prueba de aglutinación en sangre que da como resultado el tipo sanguíneo del individuo.

Materiales†

Sangre fresca 2.5ml

† Tubo de tapón morado con anticoagulante†

Palillos de madera† Placa de porcelana escavada para tipo sanguíneo

† Algodón con alcohol (2 torundas sin alcohol)

† Masquen tape para etiquetar placa

† Tipificadores para tipo sanguíneo (reactivo), AntiA, AntiB, AntiD.

† Papel secante, papel para cubrir mesa

† Mesa de laboratorio

† Pipeta Pasteur (bulbo)

Desarrollo prueba de aglutinación

1. Técnica de ven punción

2. Una vez obtenida la sangre fresca del paciente en volumen de 2.5 ml, se trasvasa al tubo de tapón morado con anticoagulante en el que se le dan ligeros movimientos para que se mezcle con el anticoagulante y poder ser utilizada.

Se utiliza la pipeta Pasteur con bulbo de extracción y se extrae una cantidad de sangre del tubo ya indicado para puntear una pequeña gota en cada excavación en la placa de porcelana, el resto de sangre se deposita en el tubo, se enjuaga a la pipeta y se conserva cuidadosamente.

Una vez punteada la placa escavada de porcelana se le agrega una gota de reactivo en cada excavación para poder obtener una reacción entre sangre y suero sanguíneo.

1. Se aplica el reactivo AntiA como numero 1 es de color

2. Se aplica el AntiB como numero 2 una ves obtenida la prueba de aglutinación debemos reportar nuestro trabajo dentro del marco, pre analítico, analítico, y pos analítico.

NOTA Las pruebas realizadas desde medio de cultivo practica #1 asta la practica #9 serán reportadas en forma ordenada, con separadores internos de practica y una pestaña del lado derecho superior del documento indicando el numero de practica y nombre.

Durante el trayecto de este trabajo el alumno debe clasificar sus practicas acomodándolas de tal forma en cada 1 de las etapas ya mencionadas pre analítica, analítica, pos analítica, ósea que las practicas deben de estar dentro de este marco mencionado.

La practica final de aglutinación en plasma y aglutinación en sangre deben tener el marco de pre análisis, análisis y pos análisis.

practica 8

Pruebas de aglutinación en suero plasmático.

Prueba de laboratorio denominada reacciones febriles por aglutinaciónInvestigar el concepto de aglutinación.

Anexar la investigación en el área de pruebas serológicas.

Cuadro de enfermedad de tifoidea paratifoidea anexar, la investigación de salmonella y gráficos de brucella abortus y proteus.

Investigar las características coloniales de cada uno de los microorganismos pertenecientes a las heterobacterias.

Materiales

† Paciente

† Jeringa 5ml

† Torniquete

† Torundas alcoholizadas

† Tubo con tapón rojo sin anticoagulante

† Laminilla de cristal para reacciones febriles o excavada

† Palillos de madera

† Papel secante

† Centrifuga

† Tubo de ensaye(vacio)

† Microscopio

† GradillaTécnica de ven punción la cual ya se dio anteriormente.

desarrollo :

Una vez extraída la sangre se toma el tiempo de coagulación, desde su salida asta que esta coagule la gradilla.

Unas ves coagulada retiramos el tapón del tubo, con número de mesa, datos del paciente y fecha, y introducimos de forma ordenada a la centrifugada, para operarla la centrifuga a 1500 revoluciones por minuto durante 5 minutos.

Ya centrifugada la sangre se retira de la centrifuga, se vierte el plasma al tubo vacio, se desecha el paquete sanguíneo, utilizando la NOm-087 de la cual ustedes deben de dar un pequeño reporte.

Una vez que se tenga el plasma en el tubo indicado se realiza el conteo en la laminilla de cristal utilizando una pipeta Pasteur con bulboYa punteada la muestra de plasma en la laminilla de cristal se mezcla con pedacitos de palillos de madera, utilizando un pedazo por Cada serotipo que es H, O, A, B brucella abortus, proteus 0x19Ya mezclados los serotipos se les da un ligero movimiento de izquierda a derecha y de enfrente hacia atrás para estar seguro que la mezcla sea correcta.

NOTASe le aplica una gota de reactivo febriclean a cada uno de los serotipos ya mencionados para poder obtener el resultado en esta prueba el resultado es aglutinación.La observación es macroscópica atrás luz así como observación macroscópica en objetivo 10x de esta manera se verificara el proceso de aglutinación que se observa en forma punteada como si tuviera arenilla el liquido observando y se le determina como t, si no existe unos de estos datos, y la muestra se ve homogénea se determina como negativo.

practica 7

OBSERVACION MACROSCOPICA.

Unas ves terminadas la tinción en la laminilla de cristal se le aplica una gota de aceite de inmersión para poder observarlo.

Materiales:

Laminilla de cristal teñida

Aceite de inmersión

Hoja de papel para limpiar microscopio

Microscopio compuesto o fotonico

Torunda de algodón seca y con alcohol

Papel secante

Desarrollo:

La laminilla se le aplica una gota de aceite de inmersión.

Se monta la laminilla al microscopio sobre la platina y que quede bien ajustada con las pinzas

.Observamos el objetivo de 100x para poder clasificar las estructuras de los microorganismos encontrados esferas de 1, 2, 3,4, en cadena de 5 o 6 agrupadas.

En bastones y se le da el nombre de bacilos y las rueditas o esferas cocos.

practica 6

TINCION DE GRAM

Materiales:

Laminilla de cristal.

Aceite de inmersión.

Hoja de papel para limpiar microscopio.

Microscopio compuesto o fotonico.

Torundas de algodón secas.

Torundas de algodón con alcohol.

Papel secante.

Desarrollo:

Cada uno de los de las mesas terminó su frotis, solo aquellos que no lo hayan terminado y después de esto pasaron a hacer la tinción y hacer cada uno de los pasos necesarios dejando los reposar un minuto en cada uno de los pasos y ya finalmente lo enjuagamos y le pusimos una gota de aceite de inmersión y ya después lo miramos en el microscopio y vimos lo que se observaba y posteriormente lo apuntamos en nuestro borrador.

TINCION DE GRAM (investigacion)

La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.

Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884.

Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.Bacteria Gram positivaEn microbiología, se denominan bacterias Gram positivas a aquellas bacterias que se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram: de aquí el nombre de "Gram-positivas" o también "grampositivas".

[1] Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Posibacteria.

[2] Las restantes son las bacterias Gram negativas.La envoltura celular de las bacterias Gram-positivas comprende la membrana citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano, que rodea a la anterior.

La pared celular se une a la membrana citoplasmática mediante moléculas de ácido lipoteicoico. La capa de peptidoglicano confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la responsable de retener el tinte durante la tinción de Gram.

A diferencia de las Gram-negativas, estas bacterias no presentan una segunda membrana lipídica externa.Bacteria Gram negativa

En microbiología, se denominan bacterias Gram negativas a aquellas bacterias que no se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram: de ahí el nombre de "Gram-negativas" o también "gramnegativas".

[1] Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Negibacteria.

[2] Las restantes son las bacterias Gram positivas.Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipídicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan sólo una membrana lipídica y la pared de peptiglicano es mucho más gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram.

PRACTICA 6

TINCION DE GRAM.

Materiales..

El porta objetos con el frotis ya realizado anteriormente.

Torundas de algodón.

Cristal violeta.

Lugol.

Alcohol.

Fuerina.

Aceite de palo.

Microscopio

DESARROLLO..

Todos se pusieron el equipo de bioseguridad..

Tomamos cada quien nuestro frotis..

Después sumergimos el porta objetos en el cual se encontraba el frotis en el

cristal de violeta por 1mn..

Después lo sumergimos en el lugol por 1mn..

Después lo sumergimos en el alcohol por 1mn..

Y después lo sumergimos en el fuesina por 1 mn..

Y después lo enjuagamos el frotis en agua..

Esperamos a que se secara,

ya ya que se seco le colocamos una gota de aceite de palo..

Después lo colocamos en el porta objetos en el microscopio y lo enfocamos para observarlo y ver que es lo que tiene en el cual se observaron barios microorganismos.. Por ultimo tiramos el porta objetos y lo mismo con los medios de cultivo.

practica 5

=Elaboracion de un frotis=

Introducción:

Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida.

Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados.

La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.

Objetivos:

El alumno utilicé su destreza para la elaboración de un frotis.

Índice:

1. Materiales.

2. Instrucciones.

3. Desarrollo.

4. conclusión.

Materiales:

Cajas petri con medio de cultivo y microorganismos en desarrollo(los que crecieron)

Asa bacteriológica de platino

Mecheros de bunsen

Vaso de precipitado de 50ml

25ml de agua destilada en el vaso de precipitado

Torundas de algodón

Portaobjetos.

. Instrucciones.

1 con el asa bacteriológica se va a realizar un frotis en un portaobjetos de cristal

.2 se toma el asa bacteriológica se pone en la flama del mechero dejándola al rojo vivo para que se esterilicé, se retira del fuego, se toma una pequeña gota de agua destilada, con ella misma se extrae una pequeña muestra del material bacteriológico crecido en las cajas petri.

3.Unas ves teniendo este material en el asa se acude a depositarlo en el portaobjetos en su parte central.

Desplazando de izquierda a derecha el material bacteriológico hasta que quede una película delgada, una ves teniéndola verificamos con el instructor si ya esta lista para poder fijarla al calor.

Ya realizado el frotis se fija de forma directa, se toma el portaobjetos en sus partes a lo largo para su transporte.

Se toma el portaobjetos de forma lateral para poderlo pasar encima de la llama nunca dejar en forma directa en la flama.

Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tinción.

practica 4

OBSERVACION MACROSCOPICA

Materiales.

• Solicitar las cajas petri con medio de cultivo elaborado.

• Vernier o pie de rey.

• Cuatro torundas de algodón y 4 alcoholizadas

.• Registrar observaciones en cajas petri.

• Dos mecheros de bunsen.Desarrollo

• Se deposita en las cajas petri de la mesa de laboratorio para su observación previamente y con la mesa esterilizada con papel blanco.

• Observamos de forma macroscópica los crecimientos de microorganismos en el medio de cultivo anotando los colores, dimensiones, olores de los mas pequeños hasta los mas grandes para ello necesitamos abrir la caja en nuestro campo de esterilización con base a los dos mecheros.

• Para poder medir las colonias de microorganismos utilizaremos una herramienta de medición, vernier o pie de rey, medimos y anotamos con su respectivo grafico.Nota.

• Para poder realizar todos los trabajos en borrador y que sus gráficos sean presentes debemos contar con bicolores para poder subir los gráficos tomándole fotografías.

Cada grafico debe llevar el pie de foto donde nos indica la información de lo que estamos plasmando.

OBSERVACION MACROSCOPICA

desarrollo:

Caja 1.

siembra =tapis medio de 1/2 de cultvo= mac conkey muestra =agua de horchata

observacion:

abundante crecimiento de grumos color violeta

caja 2.

siembra = kass 1/2 de cultivo = mac conkey muestra=orina

observacion:

abundante crecimiento de manchas blancas

caja 3.

siembra= dispercion 1/2 de cultivo = mac conkey muestra= saliva

OBSERVACION:

poco crecimiento de manchas color violetaa

practica 3

=siembra=

materiales:

1._ asa

2 ._vasos de precipitado con agua destilada (15 a 20 ml)

3._ mecheros de bunsen

4 ._cajas petri con medio de cultivo elaborado

5._ papel para cubrir mesa de laboratorio

6 ._masquintape para etiquetar cajas petri

7._ jeringa desechable (5ml)

8 ._torniquetes

9 ._torundas de algodón alcoholizadas

10 ._tubos de ensaye (tapón rojo)

11._ centrifuga

12._ tubo cónico para orina

13 ._cubreobjeto y portaobjeto

Muestras de producto de desecho

1 toma de muestra (2.5ml de sangre) se deposita en el tubo de tapón rojo

2 orina (6 botes para orina)

1 portaobjeto

3 muestra de cavidad oral en espacios interdentales (hisopos)

4 agua preparada en la calle (aguas frescas)

5 raspado interdigital con portaobjetos.

Desarrollo:

Se realiza el proceso de siembra por estrías en medio de cultivo que contiene las cajas petri siendo este sólido.

Se utiliza el asa bacteriológica, pasándola por el mechero y al ponerse al rojo vivo esta queda esterilizada.

Una ve esterilizada el asa se toma una pequeña gota de agua destilada y se pasa a tomar la muestra de desecho que se pretende observar esto es en 2 materiales de preferencia sólidos.

Para los materiales líquidos solo se esteriliza, se toma el producto y se aplica en la caja petri realizando una siembra en forma de estrías de los 7 tipos mostrados en el pizarrón.

Para poder sembrar una muestra de caveado de oral de espacio interdental se requiere un hisopo esterilizado, tomando la muestra del paciente en su cavidad oral y se aplica en caja petri en forma de estriado.

Dentro de los 7 modelos de siembra, uno de ellos requiere varilla de cristal para poder sembrar el producto el cual séle da el nombre de siembra de dispersión.

Las cajas petri sembradas se deben depositar en la estufa de incubación a 37 grados centígrados.

Durante el proceso practico debemos realizar nuestra bitácora de actividades, elaborando en 1 hoja cuadriculada para asignar cada una de la actividades enumeradas llevando secuencia en tiempos y en la cual debemos anotar fechas de trabajo realizado.